胰酶細(xì)胞消化液(含酚紅)
產(chǎn)品編號(hào)
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產(chǎn)品名稱
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包裝
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RT0220
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胰酶消化液(含酚紅)
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100ml
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說明書
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一份
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● 產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
胰酶細(xì)胞消化液(Trypsin-EDTA Solution)含0.25%胰酶(Trypsin)和0.02%EDTA,不含Ca2+和Mg2+,含酚紅。該消化液已用0.22μm濾膜過濾除菌,可以直接用于培養(yǎng)細(xì)胞的消化,或者一些組織的消化。有EDTA的胰酶比不含EDTA的胰酶消化效果更好,但制備原代細(xì)胞一般不能用含EDTA的胰酶(否則不容易貼壁),用于流式細(xì)胞分析的也不能用含EDTA的胰酶(否則殘留EDTA會(huì)將后續(xù)緩沖液中的Ca離子螯合)。
本胰酶細(xì)胞消化液具有方便快速的特點(diǎn),通常室溫消化1分鐘左右就可以消化下大多數(shù)貼壁細(xì)胞。
● 保存條件:
低溫運(yùn)輸,-20℃保存,有效期一年。
注:由于低溫影響胰酶消化液的pH值,-20℃貯存下溶液有時(shí)會(huì)變成淡黃色,4℃融化后會(huì)轉(zhuǎn)變?yōu)榧t色,這種顏色的變化不會(huì)影響胰酶的消化能力。
● 注意事項(xiàng):
① 在使用胰酶細(xì)胞消化液的過程中要特別注意避免消化液被細(xì)菌污染。
② 胰酶細(xì)胞消化液消化細(xì)胞時(shí)間不宜過長(zhǎng),否則細(xì)胞鋪板后生長(zhǎng)狀況會(huì)較差。
● 使用說明:
1. 貼壁細(xì)胞的消化:
a) 吸去培養(yǎng)液,用無菌的PBS、Hanks液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
b) 加入少量胰酶細(xì)胞消化液,略蓋過細(xì)胞即可,室溫放置30秒至2分鐘。
注:不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
c) 顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化,或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來;此時(shí)吸除胰酶細(xì)胞消化液;加入含血清的完全細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
d) 如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入胰酶細(xì)胞消化液重新消化。
e) 如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過長(zhǎng),未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落,直接用胰酶細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000-2000g離心1分鐘,沉淀細(xì)胞,盡量去除胰酶細(xì)胞消化液后,加入含血清的完全培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2. 組織的消化:
不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。