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RealSafe Gold核酸染色劑
● 產(chǎn)品規(guī)格:
產(chǎn)品編號(hào)
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產(chǎn)品名稱
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包裝
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貯存
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運(yùn)輸
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GR003
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RealSafe Gold核酸染色劑
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0.5
ml
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4-8℃
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常溫
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-
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說(shuō)明書(shū)
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一份
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● 簡(jiǎn)介:
RealSafe Gold?是一種可以替代溴化乙錠(EB)的綠色熒光核酸染色劑,與SYBR Gold是類似產(chǎn)品。與SYBR或EB相比,RealSafe Gold最顯著的特性是其在多種條件下的高靈敏性和穩(wěn)定性。另外,與RealSafe Red相比,RealSafe Gold在藍(lán)光儀下條帶更清晰。同時(shí),相對(duì)EB或SYBR,RealSafe Gold誘導(dǎo)突變的能力極低。
特點(diǎn):1.
靈敏度高,小分子片段更清晰。
2. 對(duì)核酸上樣量有更好的兼容性,不會(huì)出現(xiàn)濃度高片段彎曲現(xiàn)象。
3. 染料在膠中遷移度低,電泳后紫外觀察不會(huì)出現(xiàn)陰陽(yáng)膠現(xiàn)象。
4.
花菁素染料,安全無(wú)毒。
5.
對(duì)單鏈DNA有更高的靈敏性。
● 貯存、效期及運(yùn)輸:
4-8℃避光保存,有效期2年,常溫運(yùn)輸。
● RealSafe Gold的使用方法:
注意:染料使用前應(yīng)在常溫下徹底融化混勻后使用。
1. RealSafe Gold預(yù)染方法(推薦方法):
1.1
將RealSafe Gold試劑按1:10000溶于瓊脂糖凝膠溶液中,充分混勻。(例如:將5 μl RealSafe Gold 試劑加入到50 ml 凝膠溶液中)。注:由于RealSafe Gold 具有出色的熱穩(wěn)定性,可將試劑直接加入高溫的凝膠溶液中,而不用等凝膠溶液冷卻后再加入。
1.2 澆制凝膠并使其凝固后上樣電泳。
注意:使用這種預(yù)先加入染色劑的瓊脂糖凝膠,每次不易加入太多的 DNA 樣品,否則容易造成飽和現(xiàn)象,可以做多個(gè)不同濃度的 DNA Marker,以確定最佳 DNA 上樣量。
1.3推薦藍(lán)光下觀察結(jié)果。
注:如果始終出現(xiàn)拖尾或是條帶無(wú)法分離的現(xiàn)象,您可以使用后染法對(duì)DNA染色,以確認(rèn)問(wèn)題是否與染色劑有關(guān)。如果使用后染法問(wèn)題依舊存在,則說(shuō)明問(wèn)題與染色劑無(wú)關(guān),請(qǐng)嘗試減少核酸的上樣量后進(jìn)行電泳。
2. RealSafe Gold后染方法:
2.1
用水將RealSafe Gold稀釋約3,300倍,制成3X染色溶液。(例如:將15 μl RealSafe Gold加入到45 ml 水中)。
2.2 將凝膠小心地放入合適的容器中,如聚丙烯容器中。緩慢加入足量的3X染色溶液浸沒(méi)凝膠。
2.3
在常溫下輕輕地?fù)u動(dòng)凝膠板,最佳的染膠時(shí)間為30 分鐘,這取決于凝膠板的厚度、瓊脂糖或聚丙烯酰胺的濃度和 DNA 的長(zhǎng)短。凝膠越厚或瓊脂糖的濃度越高,染色所需要的時(shí)間就越長(zhǎng)。
注:染色溶液至少可重復(fù)使用2-3次。如果不是立即再用的話,建議將用過(guò)的染色溶液冷藏保存。
2.4 推薦藍(lán)光下觀察結(jié)果。
● 實(shí)驗(yàn)示例:
1 瓊脂糖凝膠RealSafe Gold染色:
2. PAGE凝膠染色:
RealSafe Gold染色
10% PAGE TBE Gel
RealSafe Gold需要用藍(lán)光儀下才能看得更清楚,紫外下靈敏度不夠